Markery wielu linii komórek krwiotwórczych w szpiczaku mnogim

ZRÓŻNICOWANIU hematopoetycznych komórek progenitorowych do linii rodowych towarzyszy aktywacja genów regulujących ekspresję antygenów powierzchniowych charakterystycznych dla każdej linii komórkowej i każdego etapu różnicowania. Antygeny te, znane jako markery powierzchniowe, są stosowane w diagnostyce i klasyfikacji nowotworów hematologicznych, ponieważ wskazują one na linię i stopień różnicowania komórek nowotworowych.1 Szpiczak mnogi jest rakiem z komórek B, zazwyczaj związanym z morfologią i funkcją dojrzałych komórek plazmatycznych. Istnieje jednak coraz więcej dowodów na udział wczesnych limfocytów B w szpiczaku.2 3 4 5 6 7 8 Wśród dowodów na obecność nowotworowych komórek preB w szpiczku jest ekspresja antygenu GALLA przed ostry antygen limfocytarny), często bez immunoglobulin cytoplazmatycznych, w szpiku kostnym około 50 procent pacjentów ze szpiczakiem, 2 3 4 obecność komórek preB we krwi obwodowej, 5 i różnicowanie limfocytów niosących CALLA do monoklonalnych komórek plazmatycznych z zgodne izotypy6. W najnowszych badaniach wykazano obecność antygenów szpikowych na komórkach szpiczaka i stwierdzono, że mają one związek ze złym rokowaniem9. Obecność komórek nowotworowych wykazujących ekspresję antygenów szpikowych w tym nowotworze komórek B sugeruje zaangażowanie innych komórek krwiotwórczych. linie i popiera hipotezę, że istnieje powszechna pierwotna zmiana nowotworowa we wszystkich nowotworach hematologicznych. Aby ustalić, jak często iw jakim stopniu różne linie krwiotwórcze są zaangażowane w szpiczak plazmocytowy, mierzyliśmy ekspresję genów związanych z rodowodem przez komórki nowotworowe w aspiratach szpiku kostnego od pacjentów ze szpiczakiem. Zastosowaliśmy dwu-parametryczną cytometrię przepływową do identyfikacji ekspresji megakariocytarnych, mielomonocytowych i erytroidalnych markerów przez aneuploidalne komórki szpiczaka.
Metody
Pacjenci
Przebadaliśmy 27 pacjentów z rozpoznaniem szpiczaka mnogiego DNA. Wszyscy pacjenci wyrazili świadomą zgodę, a badanie zostało zaaprobowane przez komitet ds. Badań naukowych na Uniwersytecie w Arkansas. Dwanaście pacjentów badano w momencie rozpoznania, przed rozpoczęciem leczenia, a sześciu w momencie nawrotu. Siedmiu pacjentów z chorobą, która nie reagowała na terapię, zostało przebadanych po zakończeniu leczenia, a dwóch pacjentów, którzy odpowiedzieli na leczenie, przebadano między kursami chemioterapii. Aspiraty szpiku kostnego poddane działaniu heparyny poddano rozdziałowi gęstości Ficoll-Hypaque (ciężar właściwy, 1,077 g na centymetr sześcienny). Komórki jednojądrzaste o gęstości lekkiej zebrane z osocza Ficoll-Hypaque zbadano pod względem ploidii i monoklonalnej cytoplazmatycznej immunoglobuliny za pomocą cytoplazmatycznej cytometrii przepływowej immunoglobuliny jak opisano powyżej. 10 Ponieważ nie było wystarczających ilości komórek do wykonania wszystkich testów na komórkach na próbkach od wszystkich pacjentów. kolejność badań laboratoryjnych została losowo przydzielona, aby zminimalizować nieumyślne obciążenie.
Odczynniki
Tabela 1. Tabela 1. Sondy do ekspresji genów związanych z liniami. Ekspresję mieloidowych, megakariocytarnych, erytroidalnych i limfatycznych antygenów przez komórki nowotworowe szpiczaka badano za pomocą przeciwciał monoklonalnych
[patrz też: olx świdnik, etylowanilina, olx orzysz ]